二氧化碳培养箱如何正确使用以延长其寿命

大多数细胞在培养过程中需要37C、5%CO,浓度及 饱和湿度的生长条件,二氧化碳培养箱则提供了良好的生长环境。现在国内大部分的 生物实验室都采用热导法培养箱,每台培养箱耗资4.5万~5. 5万元,使用寿命10年。根据中南地区及我校的 废维修资料显示,平均使用寿命为6.5年,主要原因是传感器的损坏。C02培养箱价格昂贵,我们希望它能按时或迟交服务,为正确使用,根据其结构和性能要求,现介绍培养箱正确使用方法,以及常见故障的预防与处理。我司提供使用微流控芯片所需的夹具、接头、导管、细胞培养箱、恒压泵、哈佛注射泵、显微镜等;咨询热线:17312666002(同微信)。

一、温度传感器的保护

培养箱温度由温度传感器控制,其正常工作要求室温条件为25C。在一般情况下,将1~2支水银温度计放在箱内作为温度对照。正确地操作温度传感器,使设定温度数,箱面显示数,箱内温度保持一致。在室温超过30C时,温度传感器的调节功能失效,出现箱体表面显示.温度高于设定值,箱体内部温度又高于设定值,且常伴有警告声。白天发生这种现象,降低室温,使培养箱温度恢复正常。如果在夜间发生,持续的高温会导致细胞死亡。为了防止这种现象,在夏季使用培养箱时,无菌室应保持室温约25C。

二、气敏保护.

三、Co,零点漂移监测:

在使用培养箱的过程中,Co,压力零点会出现自然漂移,这一现象在箱面气体显示框中无法看到,实验人员也很难察觉到漂移结果,细胞培养液颜色异常,细胞生长缓慢甚至死亡。二氧化碳气压的零点是否漂移,可以通过C0,气体检测仪,取箱检查气体来确定。例如,我们测试了6个培养箱,其显示值均在5%左右,测试结果是2个培养箱内、外气压值一致,其余4个培养箱内、外气压值最高,最高为18%,最低 为0.5%,这些异常气压值对细胞实验结果有影响。为此,实验室应建立CO,气压零点测试系统,该系统一般每3个 月测试一次, 以确保C0,气压实际使用值正确。

四、培养箱湿度监测.

二氧化碳培养箱在使用过程中,需要在培养箱托盘上放入一定量的杀菌水(3/2至全盘) ,使培养箱处于湿度饱和的环境中,这是为了满足开放培养细胞的要求。由于在饱和湿度的环境下培养液中的CO,不会发生逃逸,使培养液的pH值趋于稳定,有利于细胞的生长。实验中,由于实验人员经常忘记补水,使培养的细胞经常处于低湿甚至干燥的高温环境中,导致培养液中的CO。气体易挥发,液体pH升高,影响细胞 生长。为了防止此类情况的发生,我们采用了箱面大字警示与值日生责任制度相结合的办法,使这一措施得到了 很好的落实。另外,针对箱内湿热环境易感染细菌等问题,我们采用在1000m1水中加入2ml新洁尔灭液,对箱内空气进行定期消毒,对培养物进行酒精消毒,以降低箱内微生物感染速度。在实验中,培养基分区存放,培养物用筐或瓷盘存放,这样能快速存取,缩短开门]时间,减少箱内气体和湿度的变化,节省气体,稳定细胞生长环境。

如前所述,二氧化碳培养箱在使用过程中,只要做好室温、湿度和C0,气压的零点试验及校正工作,就可以保证C0-培养箱的正常运转,使其成为培养细胞舒适的摇篮。

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